Estudos das características fisiológicas e genéticas de isolados de Colleotrichum spp. coletados em lavouras cafeeiras (Coffea arabica) de Minas Gerais. 1-Testes de patogenicidade e análise molecular

Abstract

Procedeu-se a análise molecular da diversidade genética dos diferentes isolados do fungo Colletotrichum sp., por meio da técnica RAPD-PCR com DNA genômico dos isolados coletados. Foram testados sete oligonucleotídeos e o padrão de amplificação gerado para cada primer foi analisado em gel de agarose a 1%. Foi realizada inoculação em plântulas de cafeeiro com um par de folhas, na concentração de 4X10 6 conídios/ml. Utilizou-se uma concentração de 10 ml de suspensão e as plantas foram acondicionadas em câmara de nevoeiro por 3 dias. Relacionou-se o padrão molecular dos isolados pela análise de cluster com o teste de patogenicidade em plântulas das variedades Mundo Nôvo e Catuaí e também em frutos. Dentre os oligonucleotídeos, cinco geraram 33 marcadores polimórficos, detectando-se pela análise de grupos a maior distância genética entre os isolados de 23,6 %. Os vinte e dois isolados foram separados em seis grupos distintos ao nível de 16% de divergência, sendo que o maior grupo consistiu de 17 isolados divididos em seis subgrupos (13 % de divergência). Resultados diferenciais da patogenicidade de oito isolados em plântulas, associados a análise molecular sugerem diferentes espécies e /ou patótipos (raças) de Colletotrichum gloesporioides patogênicos e não patogênicos, associados ao cafeeiro em Minas Gerais.

This work was based in the molecular analysis of different Colletotrichum isolates by RAPD-PCR. Seven oligonucleotides were used .Coffee seedlings at two leaves stage were inoculated in concentration of 4 x 10 6 conides/ml. After the innoculation, the seedlings were kept in a growth chamber under high relative humid for three days. A relatioship was found determined between characteristcs and patogenicity in seedlings of the Mundo Nôvo and Catuaí cultivars. A total of 33 polimorfics makers was found with five oligonucleotides. The largest genetic distance was 23,6%. Twenty isolates were separated in six groups with 16% of divergence. The largest group included 17 isolates divided in thirteen new groups with 13% of divergence. The results suggested that there are differents species of Colletotrichum or diferente patotypes/races of Colletotrichum gloesporioides associated with coffee plants in Minas Gerais State.